PCR,RT-PCR相关酶
20×EvaGreen荧光染料
EvaGreen
是一种用于实时定量PCR(qPCR)的DNA结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于SYBR
Green I。除了有相似的光谱特性, EvaGreen有三个主要特点使它区别于SYBR
Green I。
1.EvaGreen对PCR的抑制性远小于SYBR
Green I,因此,使用EvaGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。
2.EvaGreen在实验中可以使用较高的浓度,从而获得远强于SYBR Green
I扩增信号;较高浓度的EvaGreen也消除了“染料重分布”的缺陷,使EvaGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲线分析(
HRM );该分析正被越来越多的用于PCR后的基因分型和异源双链分析。由于SYBR
Green I 对PCR的抑制性,从而要求其使用浓度必须很低,因此SYBR
Green I无法解决由低浓度造成的染料重分布问题,既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同时,染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性,因为低熔点的DNA链可能由于这种原因而无法检测到。
3.EvaGreen
的稳定性极好。在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。与之相反,SYBR
Green I不稳定而且降解后对PCR抑制性更强。
编号 |
规格 |
售价¥
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说明书下载 |
RF024 |
100ul |
200.00 |
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产品特性:
使用方法:
Reagent |
Quantity, for 50 μl of reaction mixture |
Final concentration
|
10X Taqbuffer(without MgCl2) |
10ul |
1X |
25mM MgCl2 |
4-5ul |
2.0-2.5mM |
10mM dNTP |
1ul |
0.2mM |
20ⅹEvaGreen |
1.25-2.5ul |
0.5X-1X |
PrimerI(25pmol/ul) |
1ul |
0.5pmol/ul |
PrimerI(25pmol/ul) |
1ul |
0.5pmol/ul |
Taq(5U/ul) |
0.4ul |
2U/50ul |
Template DNA |
variable |
50 pg -1 μg |
ddH2O |
Up to 50ul |
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参考文献:
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