某些序列含有大量疏水氨基酸 , 如 Trp 、 Phe 、 Val 、 Ile 、 Leu 、 Met 、 Tyr 和 Ala 等 , 当这些疏水残基大于 50% 通常难于溶解。为了增加肽的极性 , 加长序列可能会有帮助。另外一种选择是通过减少疏水残基的方法降低肽链的长度以增加极性。肽链极性越高 , 就越有可能溶于水。
加入可溶性残基
对于某些肽链而言 , 加上一些极性氨基酸能改善可溶性。我们推荐给酸性肽的 N 端或 C 端加上 Glu-Glu 。给碱性肽的 N 端或 C 端加上 Lys-Lys 。如果不能加入带电荷基团 , 可以将 Ser-Gly-Ser 加到 N 端或 C 端。但是 , 肽链的两端不能改变时 , 该方法则不可行。
通过置换一个或多个残基改变序列
肽链的可溶性可通过改变序列内某些残基来改善。通常单个残基的替换就能显著改善其疏水性 , 而这种改变通常是较为保守的 , 如用 Gly 代替 Ala 。
氨基酸按其亲水性、疏水性分类 亲水性氨基酸 : D, E, H, K, Q, R, S, T, 羟脯氨酸 , 焦谷氨酸
疏水性氨基酸 : A, F, I, L, M, P, V, W, Y, α- 氨基丁酸 , β- 氨基丙氨酸 , 正亮氨酸
C 和 G 属于未定类
其它的分类方法 在温和条件下氧化的氨基酸 -->C, M
脱氨或脱羧基的氨基酸 -->N, Q
蛋白制备中易降解的氨基酸 -->M, W
带正电荷的氨基酸 -->K, R, H
带负电荷的氨基酸 -->D, E
当下列疏水氨基酸 , 即 Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Met, Phe, Trp 存在于 C 端时 , 通常引起合成及纯化的困难 , 这主要是因为它们难溶于水。如果您看见这些氨基酸 , 即 Cys 、 His 、 Pro 普遍存在于序列中或在 C 端时 , 则在常规的固相合成中需要特殊的固相支持物。在用普通的固相支持物时 , 在二肽阶段 , 由于环化引起的损失非常高。在许多例子中 , 甚至导致所有链从固相支持物上损失 , 但是若 C 端为氨基化 Pro 时 , 或者用特殊的 PEG- 聚苯乙烯固相支持物时 , 能使产量大为提高 , 则不会发生这种现象。
多肽保存 冻干多肽可 -20℃ 保存或室温保存;溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性 pH(pH5-7), -20℃ 保存的;为避免样品的反复冻融,最好分成小样存放。一份样品如果冻融后未用完,应扔掉不再使用,因为细菌的降解有时会成为溶液肽的麻烦,所以多肽应溶于无菌水或多肽溶液用 0.2μ M 滤膜过滤后保存。
对于含 Cys, Met orTrP 的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽极易被空气氧化,最好用惰性气体填充保存。另外含 Gln 或 Asn 的多肽也容易降解。
多肽溶解
大多数多肽的首选溶剂是超纯抽气水;稀乙酸或氨水分别对碱性或酸性多肽的溶解也很有帮助。如果这些方法度过后还不溶的多肽,建议用 DMF 、脲、 guanidiniam chloride 或 acetonitnle 来溶解,但这些溶剂可能对某些实验有副作用,所以我们建议设计多肽时要多加留意,如残基 Ala 、 Cys 、 Ile 、 Leu 、 Met 、 Phe 和 Val 都会增加多肽的溶解难度。
ADM2 Peptide:
1.Human
IMD1-53:HSGPRRTQAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
Human
IMD1-47:TQAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
Human IMD8-47:VGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
2.Mouse
IMD1-53:PTGSRRPHAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLVRPAGRRDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
Mouse
IMD1-47:PHAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLVRPAGRRDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
Mouse IMD8-47:VGCVLGTCQVQNLSHRLWQLVRPAGRRDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
3.Rat
IMD1-53:HVGSRRPHAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLVRPSGRRDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
Rat
IMD1-47:PHAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLVRPSGRRDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
Rat IMD8-47:VGCVLGTCQVQNLSHRLWQLVRPSGRRDSAPVDPSSPHSY-NH2(N-C)
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用途
主要用于抗体的制备、多肽疫苗、多肽微注射及对基因结构与功能关系的研究。
说明
多肽合成价格原则上以每个氨基酸残基数计, “aa” 代表 “ 氨基酸残基 ” ; 含有特殊结构的肽链或 aa ,如 -(-S-S-)- 、非天然 aa 、修饰 aa 等,价格需要协商。
上述价格为参考价,确定的价格视多肽序列将作上、下变动,其中少于 6 个 aa 的 按 6 个 aa 计算。
MAP相关文献
MAPS is a method for producing high-titer anti-peptide antibodies (1,2) and synthetic peptide vaccines (3). This system utilizes the a- and e-amino functional groups of lysine to form a backbone to which multiple peptide chains are attached. Depending on the number of lysine tiers (2, 4, 8, etc.), different numbers of peptide branches can be synthesized. Using this new technology, our customers have successfully produced high-titer antibodies.
1. Wang, C. Y., Looney, D. J., Li, M. L., Walfield, A. M., Ye, J., Hosein, B., Tam, J. P. and Wong-Staal, F. "Long-term high-titer neutralizing activity induced by octameric synthetic HIV antigen" Science 254, 285-288 (1991).
2. Posnett, D., McGrath, H., and Tam, J. P. "A novel method for producing anti-peptide antibodies" J. Biol. Chem. 263, 1719-1725 (1988).
3. Tam, J. P. "Synthetic peptide vaccine design: synthesis and properties of a high-density multiple antigenic peptide system" PNAS USA 85, 5409-5413 (1988).